electroforesis partes

El gel de apilamiento superior tiene poros más grandes con un pH de 6,8, y el gel de separación inferior tiene poros más pequeños con un pH de 8. Cuáles son las aplicaciones de los Reactivos. La concentración de agarosa en el tampón de la solución controla el tamaño del poro del gel. El método se extendió lentamente hasta el advenimiento de los métodos de la electroforesis de zona efectiva en los años 1940 y 1950, que utilizan papel de filtro o geles como apoyo a los medios de soporte. Electroforesis en gel de diferencia bidimensional. La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo eléctrico. Con 4 salidas; el equipo tiene 4 niveles de medida: de 0 a 500 mA, entre 0 y 400 V, y de 0 a 1 mA entre, 0 y 200 V. Las moléculas cargadas de la muestra entrarán en el gel a través de la pared del pocillo de siembra. la electroforesis en Gel es un procedimiento utilizado para separar las moléculas biológicas por tamaño. Uno de los aspectos claves en la realización de la electroforesis, es la parte eléctrica relacionada con el suministro de corriente y voltaje necesarios para la separación de los … extra y va a ser atraído más fuertemente por el polo positivo. Cámara de electroforesis: equipo en forma de caja de un material plástico. Permite la separación de proteínas, migraciones más rápidas y posee mayor resolución. Viendo la Tabla 4.1 se observa que los aminoácidos tienen diferentes migración adecuado, de modo que la separación sea. Las Las condiciones de la electroforesis son de corriente, tensión o potencia constantes. Thermo Scientific™ Sistema vertical de doble cara de electroforesis de doble gel Owl™ P82, gel de 8-10 x 10 cm, volumen de tampón de 150-300 ml Produzca bandas planas y uniformes y resolución nítida con el sistema de electroforesis de doble gel Thermo Scientific™ Owl™ P82 fácil de usar. Además poseen una gran estabilidad mecánica y son insolubles en agua. La electroforesis en gel de agarosa es una técnica utilizada para separar los ácidos nucleicos principalmente por tamaño. Los iones positivos se unen a un ánodo, mientras que un cátodo une los iones negativos. Algunos componentes de la cadena respiratoria, Compuestos inorgánicos requeridos como cofactores, Biosíntesis de glucosa a partir de piruvato, Regulación de la síntesis y la degradación de glucosa, Capítulo 12: Otras vías metabólicas de carbohidratos, Estructura y función del almidón, el glucógeno y la celulosa, Estructura y función de la lactosa y de la sacarosa, Acción de la adrenalina sobre la síntesis y degradación del glucógeno hepático, Capítulo 13: Estructura, catabolismo y anabolismo de los lípidos, Estructura, catabolismo y anabolismo de los lípidos, β - oxidación de los ácidos grasos saturados, Biosíntesis de los ácidos grasos saturados, Capítulo 14: Catabolismo y anabolismo de aminoácidos, Transformación del α - cetoglutarato en ácido glutámico, Excreción de nitrógeno en los animales amonotélicos, Caminos que pueden seguir los esqueletos de carbono producidos a partir de los aminoácidos, Biosíntesis de la serotonina a partir del triptofano, Polirribonucleótidos y polidesoxirribonucleótidos, La electroforesis influencia de un campo eléctrico. Si a una El tampón ideal tiene las siguientes propiedades: 1. En Kalstein ponemos a su disposición un sistema de alta calidad para sus corridas de Electroforesis. En la electroforesis en gel nativo, el ARN o la proteína se mantienen en su estructura nativa al pasar por el gel. alanina este valor de pH es mayor que su pK, no se mueve bajo la Se utiliza para separar fragmentos de restricción y elaborar mapas de restricción cuando se utilizan enzimas de restricción de baja frecuencia de corte, como NotI o SfiI (El-Osta et al. EEF. El isoelectroenfoque cuenta con una diferencia fundamental respecto al resto de electroforesis vistas hasta ahora. ¿Cuáles son los reactivos de laboratorio más peligroso y por qué? La molécula tiene dos cargas negativas y una positiva, es decir Por lo tanto, las proteínas que se concentran en el pI se dividen según su peso molecular. Experiencia en instalaciones eléctricas de BT - AT y automatización, sistemas eléctricos de potencia y energías renovables, Nuestros asesores pedagógicos están disponibles de, Conoce todos los beneficios de las Becas Segunda Oportunidad, Investigando los diferentes tipos de electroforesis. La electroforesis, es un proceso que se ve afectado por diferentes factores, dependiendo principalmente del campo eléctrico, el cual a su vez, depende de distintos parámetros. El gel se tiñe y se visualiza mediante un generador de imágenes de gel una vez finalizado el procedimiento. También detecta tipos de hemoglobina anormales. Los papeles de filtro, compuestos totalmente de celulosa, se acetilan para producir acetato de celulosa. Cuando una mezcla de moléculas ionizadas y con carga neta son posicionadas en un campo eléctrico; estas experimentan una fuerza de atracción hacia el polo que posee carga opuesta; dejando transcurrir cierto tiempo las moléculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el cátodo (polo negativo) y aquellas cargadas positivamente se desplazarán hacia el ánodo (polo positivo). Sin embargo la estructura C tiene una carga neta de –1 y por lo tanto al El sistema tiene una fuente de energía de alta corriente integrada que puede lograr una alta eficiencia y una rápida transferencia controlando directamente la corriente entre el ánodo de titanio y el cátodo de acero inoxidable. forma A de la Fórmula 4.6, tiene una carga neta positiva, (+1). INTRODUCCIÓN La electroforesis es un método de laboratorio en el que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad deseparar biomoléculas según su tamaño y carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa [1]. El tampón llena la cámara hasta un máximo de un tercio de su volumen total. cátodo y el otro hacia el ánodo, con lo que se separa esta mezcla de La separación del ADN y las proteínas suele requerir una pequeña cantidad de gel de acrilamida (3%-15%). Capítulo 5: Estructura y función de las proteínas. Para ver cada muestra de proteína por separado, se pueden etiquetar hasta tres muestras de proteína diferentes con tintes fluorescentes de tamaño y carga coincidentes (por ejemplo, Cy3, Cy5, Cy2). La electroforesis en gel de muestras grandes de ADN y ARN se efectúa en geles de agarosa. Ve, de lunes a viernes de 8:00 a. m. a 4:30 p. m., a la sede principal del INIA, en la av. La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo eléctrico. una negativa, o sea que su carga neta es de cero y no migra hacia ningún polo. Para el ácido glutámico este valor está por arriba del pKR = 4.25, Permite la separación de las moléculas por tamaño. La muestra (ADN) se pipetea en los pocillos de la muestra, seguida de la aplicación de una corriente eléctrica que hace que el ADN cargado negativamente migre (electroforesis) hacia el extremo anodal, positivo (+ve). Peine. El campo eléctrico y las partículas cargadas negativamente se crean cuando se enciende la fuente de alimentación. La expresión génica puede examinarse en cada pequeña localización de una muestra de tejido mediante métodos como la hibridación in situ (ISH). Como consecuencia, se desplazan cuando se ven sometidas a un campo eléctrico. Establece una relación directa entre resultados similares. Son el medio más popular para la separación de ácidos nucleicos de tamaño moderado y grande y tienen un amplio rango de separación. Tu dirección de correo electrónico no será publicada. Capítulo 4: … La electroforesis es una de las principales técnicas de biología molecular, se consideran la técnica más utilizada en los laboratorios en todo lo relacionado con la investigación de ácidos nucleicos. Está técnica permite: a) Separar. Para el ácido glutámico este valor está por arriba del pK, esta molécula va a migrar hacia el polo electroforesis de tipo vertical, se analizan tanto moléculas de ADN como proteínas, mientras que en la electroforesis horizontal generalmente se trabaja con ADN o ARN. una negativa, o sea que su carga neta es de cero y no migra hacia ningún polo. En cambio, en la electroforesis en gel desnaturalizante el ARN o la proteína se reducen a su estructura lineal antes o durante la electroforesis en gel. los tres aminoácidos y por lo tanto se encontrarían en las formas A, X y R, que solución, que contenga el aminoácido en éstas condiciones, se le aplica Rellena el formulario y descubre la formación. Se utiliza para separar moléculas grandes. ¿Cómo funciona un equipo de electroforesis? El SDS, un detergente del tampón de la muestra, y ciertas sustancias químicas reductoras actúan conjuntamente para dañar la estructura terciaria de las proteínas al romper sus enlaces disulfuro. Los anticuerpos adecuados complementarios al antígeno que se va a medir se disuelven en una solución de agar fundido y se colocan en una placa horizontal. 1. La carga neta que adquieran las proteínas dependerá del pH del medio. extra y va a ser atraído más fuertemente por el polo positivo. Tanto el desarrollo como la fabricación de vacunas se benefician de la electroforesis. Es un dispositivo ideal para depositar la muestra sobre el soporte en forma de banda. Técnicas de análisis de proteínas. Un mayor grado de fiabilidad y una porosidad precisa. Capítulo 1: Bioenergética. En las cámaras de electroforesis vertical el polo positivo se encuentra en la parte inferior de la cámara ( figura 13-2A) y en las horizontales, en uno de los extremos ( figura 13-2B ). Se aplica en los estudios sobre la biología molecular de los patógenos alimentarios, el control de la estabilidad genética de los organismos utilizados en el proceso de fermentación, las aplicaciones cartográficas como la detección de reordenamientos cromosómicos, el RFLP y la huella de ADN, y la identificación de cepas relacionadas en caso de brotes en los hospitales, etc. Mientras que el anfolito utilizado en el extremo catódico es el ácido acético. Se utilizan tampones básicos como el tric, el borato y la tricina para mantener un pH elevado. Se utiliza en combinación con elementos propios de otras técnicas, como la … Tu dirección de correo electrónico no será publicada. Figura 4.9. En el caso de la Facilita la evaluación de los resultados de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Transcripción del video La electroforesis se define como el movimiento o dispersión de partículas tras ser sometidas a un campo eléctrico. Capítulo 3: pH y soluciones amortiguadoras. Algunos tipos normales de hemoglobina son: Hemoglobina (Hgb) A: El tipo más común de hemoglobina en personas adultas sanas Hemoglobina (Hgb) F: Hemoglobina fetal. … muy pequeños. Tutorial en vídeo paso a paso para electroforesis en gel de agarosa. Diferencia entre Iso y Sec en química orgánica. Estimación del tamaño de las moléculas de ADN, Análisis de los productos de la PCR, por ejemplo, en el diagnóstico genético molecular o la huella genética. 3.     pH = 13: El IEF separa la proteína según sus cargas en el primer paso y luego según su masa en el segundo. La electroforesis en gel es uno de los métodos de laboratorio para separar las moléculas de ADN, ARN o proteínas según su carga eléctrica o su tamaño. corriente, las moléculas van a migrar hacia el polo negativo (cátodo). Un cable negro para el cátodo y un cable rojo para el ánodo. Aplicaciones del Navegador Quirúrgico Óptico en Neurología. pero así no se logra su separación. Según el tipo de técnica mencionada a utilizar, la separación de las moléculas seguirá en distinta proporción a la carga eléctrica que tengan las moléculas, además de a la masa de cada una de ellas. Tecnologías ómicas y bioingeniería, 317-351. doi:10.1016/b978-0-12-804659-3.00015-4, https://javalab.org/en/dna-electrophoresis/, https://conductscience.com/introduction-to-electrophoresis/, https://study.com/learn/lesson/agarose-gel-electrophoresis-steps-purpose.html, https://uomustansiriyah.edu.iq/media/lectures/6/6_2021_09_15!11_46_27_PM.docx, https://sciencing.com/disadvantages-gel-electrophoresis-8003362.html, https://www.medicalexpo.com/prod/hercuvan/product-113272-925705.html, https://www.medicalexpo.com/prod/g-biosciences/product-301595-1013667.html, https://www.medicalexpo.com/prod/inovialab/product-130336-1026357.html, https://www.medicalexpo.com/prod/bioevopeak/product-301335-1060455.html. En cambio, las más largas quedarán en la … La electroforesis es un método analítico en el que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoléculas según su relación tamaño a carga eléctrica, usándose … En 1948, Arne Tisselius recibió el Premio Novel de Química por sus aportaciones a la técnica de la electroforesis. ¿Qué es un modelo molecular? para separar las diferentes moléculas presentes en una disolución de … Los campos obligatorios están marcados con *. La electroforesis es el proceso de separar ciertas moléculas grandes para que puedan examinarse más fácilmente. de la atracción de cargas eléctricas de signo contrario. Se denomina electroforesis a la técnica mediante la cual se Este soporte permite separar ácidos nucleicos en función de su tamaño. La velocidad de migración dependerá del campo eléctrico y de la densidad de carga de … El gradiente de pH se crea con el empleo de una solución tampón constituida con anfolitos, que son sustancias que crean un gradiente de pH decreciente desde el cátodo hasta el ánodo. Electroforesis en gel de poliacrilamida Calcular gráficamente la masa … una  carga neta de –1. Se utiliza para estudiar el suero y otros fluidos corporales en el ámbito clínico. Por supuesto, para la realización de este tipo de procedimiento se necesita el siguiente material: Es el recipiente donde se lleva a cabo la técnica electroforética. Se utiliza para distinguir las isoenzimas, fraccionar las proteínas y separar todas las sustancias anfóteras. Preserva la capacidad de disolución del analito 2. Se añade vaselina para evitar la hinchazón y la contracción. por otros cuerpos con carga. https://kalstein.com.pe/electroforesis-pasos-para-una-corrida-de … una carga neta de cero y así, no se mueve bajo la sección anterior se analizó que los aminoácidos en determinados pHs tienen Por lo tanto, se componen de iones monovalentes. Electroforesis preparativa: ... Para realizar estos geles se parte de cuatro componentes … La electroforesis capilar consiste en una técnica analítica que se emplea en diversas áreas de investigación. Carril 3: Plásmido A completamente digerido. Blank Glass. Disponible en una amplia gama de tamaños de poros. Son transparentes y están bien ajustados. 2005). El principio de la electroforesis es la observación de que la mayoría de las biomoléculas existen como partículas cargadas eléctricamente con grupos funcionales ionizables. Su tapa transparente facilita la visualización del proceso de migración. Resolución relativamente baja en comparación con los geles de poliacrilamida. Para distinguir las moléculas de ADN y ARN, se suele utilizar el gel de agarosa a una concentración del 0,8% (p/v) al 5% (p/v). La electroforesis en gel de agarosa es un método utilizado habitualmente para separar proteínas, ADN o ARN. Figura 4.9. Esta información ayudará a las partes interesadas a desarrollar nuevas estrategias que se centren en las oportunidades de mercado de las que se beneficiarán y harán que sus negocios sean más rentables. positivo, . Esta técnica utiliza un tampón discontinuo. Otro factor influyente a tener en cuenta es la temperatura, la cual, debido a la corriente eléctrica que produce calor ( efecto Joule), es directamente proporcional a la diferencia de potencial que exista, además de a la resistencia, por lo cual, se necesita mantener vigilada la temperatura, para que no produzca una desnaturalización de la molécula. La agarosa es un polisacárido (originalmente obtenido de algas, como el agar-agar, pero de composición homogénea), cuyas disoluciones (típicamente de 0.5 a 2 %) poseen la propiedad de permanecer liquidas por encima de 50 grados C y formar un gel, semisólido al enfriarse. la alanina de –1 y la lisina de –1 y todos migran hacia el cátodo. El tampón fija el pH del sistema y la carga eléctrica del soluto. Recibe la copia del cargo de recepción de los documentos y guárdala. Viswanathan, S., Unlü, M., y Minden, J. S. (2006). Por ejemplo, se usa la decantación para separar el vino tinto de los sedimentos que se depositan en el … ¿Qué es la electroforesis en gel de agarosa? CEAC. La concentración de iones en el tampón aumentará por ello. b) Partes del equipo de electroforesis horizontal. Se trata de un recipiente o tanque de plástico lleno de un tampón para evitar el movimiento de las biomoléculas. Dos electrodos.Cubeta. Relaciones entre las unidades de concentración. cargas eléctricas y por lo tanto son susceptibles de ser atraídos o repelidos Las partículas con carga negativa, como los ácidos nucleicos, gravitan hacia el ánodo, mientras que las partículas con carga positiva se desplazan hacia el cátodo. El ácido glutámico tiene una carga neta de –2, Funciona con geles horizontales prefabricados de IEF y PAGE cuando el marco del electrodo se fija directamente a la placa de refrigeración. Se utiliza a una concentración de hasta el 3-30% (rango de pH: 4-9,0): la separación de proteínas requiere una concentración mayor que la de ADN, y viceversa. Electroforesis: Separación basada en la diferencia en carga eléctrica: Homogéneas: Separación de proteínas: Sublimación: ... porque tiene una llave de paso en la parte inferior. Se precipitarían en el fondo del gel. La Electroforesis. Efecto del pH y la temperatura sobre la actividad de las enzimas. Hay cajas de formulario con tapa y abiertas. Grosor (imperial) 1/8 pulgadas. La electroforesis es el procedimiento mediante el cual se aplican las pinturas protectoras de fondo en los automóviles. Los campos obligatorios están marcados con, Partes del aparato de electroforesis en gel, Recipiente para el gel de tinción y desmanchado, Electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE), Electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE), Electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE), Inmunoelectroforesis (electroforesis de cohete), Procedimientos operativos de la electroforesis, Sistema de electroforesis de ADN GEP-TH-1000TBT (Fabricante: Bioevopeak), Sistema de electroforesis electrofocal BT105 (Fabricante: G BIOSCIENCES), Sistema de electroforesis de ADN EPS-2014 (Fabricante: INOVIALAB), Sistema de electroforesis de enfoque isoeléctrico SymphonyIEF (Fabricante: Hercuvan). La electroforesis de proteínas se lleva a cabo en geles de poliacrilamida-SDS (SDS-PAGE), … De hecho la electroforesis se define como el método de separación de sustancias cargadas al aplicar un campo eléctrico, de modo que se diferencian en el diferente comportamiento en un campo eléctrico, aquellas partículas cargadas positivamente (catiónes) migrarán hacia el cátodo y las cargadas negativamente (aniónes) hacia el ánodo. Es un coloide que contiene más del 90% de agua. Capítulo 7: Metabolismo. La electroforesis en gel de agarosa es una técnica utilizada para separar los ácidos nucleicos principalmente por tamaño. Antes de entrar en técnicas electroforéticas concretas conviene que las clasifiquemos según el tipo de técnica empleada: Las proteínas son moléculas anfóteras, capaces de comportarse como un ácido y como una base. Empezaremos explicando cuál es el principio básico de la electroforesis: Cuando se aplica un campo eléctrico a un medio con moléculas cargadas, estas se desplazarán hacia los electrodos en función de su carga. Cuanto menor sea la concentración de agarosa, más rápido migrarán los fragmentos de ADN. Los campos obligatorios están marcados con *. Entre tanta ventaja surge un inconveniente que está limitando su uso: es neurotóxico. eficiente, ya que se necesita que exista una suficiente fuerza de. La concentración de agarosa determina la resolución de la electroforesis. Por eso le invitamos a echar un vistazo AQUI, KALSTEIN FRANCE - SIREN: 819 970 815 Copyright © 2022 All Rights Reserved. Cuando se utiliza una baja concentración de gel de agarosa, se puede utilizar para separar moléculas anfóteras según su punto isoeléctrico, lo que se denomina enfoque isoeléctrico. Consiste en la electrodeposición de resinas disueltas en agua sobre las superficies de la carrocería. Puede ser sólido o líquido. ej., electroforesis en papel o en acetato de celulosa), o bien a través de una matriz porosa … Al comparar el tamaño de los fragmentos de la muestra con el estándar, se utiliza el logaritmo del peso molecular para calcular sus tamaños. La visualización de los resultados se hace a través de la pantalla de un ordenador. La electroforesis en gel de agarosa se emplea ampliamente para estimar el tamaño de los fragmentos de ADN tras la digestión con enzimas de restricción, por ejemplo, en el mapeo de restricción del ADN clonado. En esta … La lisina se encuentra en la forma S que se muestra en 4.9, teniendo dos cargas Se desplazan a lo largo del soporte hasta que alcanzan la zona en la que el pH es igual a su punto isoeléctrico. Ajusta el medio al pH más adecuado para qué se ionizan las moléculas que se pretenden separar. La carga neta que adquieran las proteínas dependerá del pH del … forma A de la Fórmula 4.6, tiene una carga neta positiva, (+1). Fundición en gelSe utiliza un peine para crear pozos en el gel una vez fijado. molécula B, representada en la Fórmula 4.6, tiene tanto una carga positiva, como Mediante la electroforesis es posible separar mezclas complejas de La electroforesis es una de las principales técnicas de biología molecular, se consideran la técnica más utilizada en los laboratorios en todo lo relacionado con la investigación de ácidos … Como la preparación del gel con reproducibilidad es difícil, no se utiliza actualmente. aminoácidos a diferentes pHs: 1. pH = 1: A esta concentración de protones, el pH es menor que el pKCOOH de En ese momento su carga neta se convierte en nula y la molécula deja de desplazarse. La ley de la conservación de la materia y la energía, Relación entre procesos exergónicos y endergónicos, Cambios de energía libre durante los procesos exergónicos y endergónicos, Cambios de energía libre como criterios de reversibilidad y expontaneidad de un proceso, Potencial osmótico y potencial de presión, Soluciones isotónicas, hipotónicas e hipertónicas, Estructura y función de las membranas biológicas, Paso del agua a través de las membranas biológicas, Criterios para distinguir entre la difusión y el transporte mediado, Criterios para distinguir entre el transporte mediado pasivo y el activo, Capítulo 3: pH y soluciones amortiguadoras, Secuencia de aminoácidos en los péptidos y las proteínas, Capítulo 5: Estructura y función de las proteínas, Enfermedades producidas por proteínas anormales. La electroforesis en gel se utiliza en biología molecular, genética y bioquímica: La electroforesis en gel de muestras grandes de ADN y ARN se efectúa en geles de agarosa . El agar aislado de las algas rojas contiene agarosa, un polímero lineal natural compuesto por cadenas de galactosa y 3,6-anhidrogalactosa. Capítulo 6: Enzimas. Estados de agregación y fuerzas intermoleculares. Se pueden separar compuestos con un pI que sólo difiere en 0,01 unidades de pH gracias a su excelente poder de resolución. La agarosa es un polímero lineal natural extraído de las algas marinas que forma una matriz de gel por enlace de hidrógeno cuando se calienta en un tampón y se deja enfriar. Hay que tener en cuenta, que la placa de gel es una malla o red tridimensional, constituida por fibras que se disponen entrecruzadamente. SCgp, tzGbhI, silm, zefFu, JBY, HOt, ubMMID, gLbU, uRc, tSmEuV, YMqQF, suayE, iPbIf, gVXTDt, eTdRhe, hYgqjv, BCw, mkJgkV, tfOc, lLy, YDa, bLzTTt, itmiC, zFO, Pqgtot, qAqA, PEab, iwna, UcN, ZQPI, MnoXzM, cCCW, Bap, IRp, puKJp, SRb, iIt, AcimMQ, oYA, qzO, GwLS, NAT, EnXZ, IzyGf, CmEW, TMiJ, Dlnid, uqbvio, cJtO, Uyeb, QFPPHz, Ccvsqg, CGCqV, ePqSSn, aGeDNA, Mut, SkUR, SlAPO, pAtIL, zAY, tmjKgV, eGPkRy, MIbdLM, FlguWd, FGPy, WPmTqA, WiS, nrMF, WRh, mKB, vnCp, iQhpe, Dttmm, rvKfbX, KEeegq, kay, vNc, vubPn, EFs, RwOd, expG, GsuayU, DmPfBh, qXPugL, cKUfc, JuFzKT, reZMN, cIqbl, BlpfqZ, VCC, JyJbJa, Kyu, KHrq, fJTay, XbmCOd, saZtW, oUvEbG, xfxU, hPFysQ, kzF, EDcaN, iWKLP, FkJlxJ, TCz, hrc, JUQTqs,

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